江蘇蝌蚪影视科學（xué）儀器有限公（gōng）司

黃曲黴（méi）毒素免疫親和柱

簡介

    AFT免疫親和柱（zhù）適用於基質複雜、限量要求低的樣品中黃曲黴毒素B1，B2，G1，G2檢測的淨化（huà）。可以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用於穀物，食品，飼料等的樣品淨化過（guò）程。

柱容量  約200ng 黃曲黴毒（dú）素

儲存條件  2-8℃冷藏保存，不可冷凍

1 用途

用於實驗（yàn）室淨化樣品（pǐn）提取物以進行進一步分析

2 概（gài）要

黃曲黴毒素是穀類及其他農作物（wù）常見的黴變菌，是由黃曲黴和寄生曲黴產生（shēng）的一類低分子（zǐ）化合物。汙染糧食、油料作（zuò）物的種（zhǒng）子，其中以（yǐ）花生、玉米易被汙染，另外在小麥、高（gāo）粱、巴西堅果（guǒ）、豆類和大米等重要糧食（shí）中也經常被檢出。

黃曲黴毒素熱穩定性很高，一旦產生便（biàn）難（nán）以除去。對（duì）動物、植物和微生物具有很強的毒性，致癌力強，還能引（yǐn）起突變和導致畸形。

黃曲（qǔ）黴毒素作為肝癌的三大誘因之一，也是胃（wèi）癌，腸癌等疾病的主要（yào）原因，對人類的健（jiàn）康構成（chéng）很大威脅。世界各國對食品，飼料中的黃（huáng）曲黴毒素都有嚴格的限量標（biāo）準（zhǔn）。

3 原理（lǐ）

測定的基礎（chǔ）是抗原抗體反應，免疫親和柱中含有和黃曲黴毒素抗體結合在（zài）一起的凝膠，樣品中的（de）黃曲黴毒素經過提取、過濾、稀釋，然後緩慢的通過黃曲黴免疫親和（hé）層析柱，在免疫親和柱（zhù）內（nèi）黃曲黴毒素與抗體結合，其他的（de）無關物質（zhì）不（bú）會結合而直接通過免疫（yì）親和柱，之後洗滌免疫親和柱完全除去沒有被結合的其他無關物質。後加入甲醇將黃曲黴毒素釋放，然後注入到（dào）分析儀器中進行（háng）進一步（bù）的檢測。

4 提供（gòng）的試劑

l 25支/盒免疫親和柱（zhù），規格：1ml/3ml

5  操作（zuò）者應注意事項

l 黃曲黴毒素對人體有害，應戴手（shǒu）套操作。

l 使用過的玻璃容器及黃（huáng）曲（qǔ）黴毒素溶液宜用5%濃度的次氯酸鈉（nà）溶液浸泡過（guò）夜。

l 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

l 親和柱於2-8℃冷藏保存，不可冷凍

l 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫（22~25℃）

6 操作流程（符（fú）合GB/T 18979-2003國標方（fāng）法）

l 粉（fěn）碎好的樣品過20目篩並在取（qǔ）樣（yàng）前（qián）徹底混合，不立即分析的樣品應放在冰箱中儲（chǔ）存（cún）。

l 稱取20g粉碎樣品及4g氯化（huà）鈉，加入100ml 70%甲醇/水。

l 高速均質約2分（fèn）鍾，或（huò）震蕩器震蕩約30分鍾，

l 過濾樣（yàng）品至少10ml。

l 取10ml濾（lǜ）液加入20ml水，徹（chè）底混合。

l 用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取15ml準備加入到免疫親和柱（zhù）中過柱。

l 將10ml注射器連接（jiē）於免疫親和柱上（shàng）端。

l 處（chù）理好的樣品液15ml以1-2滴/秒的速度通過免疫親（qīn）和柱，棄掉流出的液體。

l 加10ml水淋洗（xǐ）柱子（zǐ）兩次，棄掉流出的液體，

l 利用真空（kōng）設備壓入空氣或用注射器吹（chuī）幹柱子中的水。

l 加入1ml甲醇緩慢洗脫，流速約為2-3秒每滴。

l 收集全部（bù）洗脫液於（yú）幹淨（jìng）的比色皿或其他容器中用於檢測。

7 操作流（liú）程圖

8 液相色譜測定條件

● 激發/發射（shè）波長：360nm/440nm

● 流動相：甲醇-水（45+55）

● 流速：0.8mL/min

● 進樣量：20ul 

● 柱（zhù）溫：30°C 

● 反應時間：10min

用進樣器吸取20µL黃曲黴毒素標準工作（zuò）液注入HPLC

色譜儀，在（zài）上述（shù）色譜條件下測定標準溶液的響

應值（zhí）（峰高或峰（fēng）麵積（jī）），得到黃曲黴毒素B1、B2、 

G1、G2標準溶液HPLC色譜圖